超微量光度計是一種精密的光學(xué)儀器,用于測量液體樣本中的微量物質(zhì)的濃度。通常在生物學(xué)、化學(xué)、醫學(xué)和環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域中廣泛應用,因為它能夠提供非常精確的測量結果,這對于研究微小樣本和進(jìn)行微量分析至關(guān)重要?;诠馕赵砉ぷ?,即貝爾-朗伯定律(Beer-LambertLaw)。該定律指出,溶質(zhì)濃度與溶液對特定波長(cháng)光的吸收成正比。當一束特定波長(cháng)的光通過(guò)含有待測物質(zhì)的溶液時(shí),一部分光會(huì )被溶液中的分子吸收,而未被吸收的光則會(huì )被檢測器捕捉。通過(guò)測量經(jīng)過(guò)樣本前后的光強度差異,可以計算出樣本中溶質(zhì)的濃度。
1.光源:產(chǎn)生穩定且單色光的部分,通常采用鹵素燈或LED。
2.樣品室:容納液體樣品的容器,設計要確保光線(xiàn)能準確通過(guò)樣品。
3.單色儀:選擇特定波長(cháng)的光通過(guò)樣品。
4.探測器:測量通過(guò)樣品后剩余光強的部件,通常使用光電二極管陣列或光電倍增管。
5.數據處理系統:將光信號轉換為數字信號,并計算得出樣品濃度的系統。
特點(diǎn):
1.高靈敏度:能夠檢測極低濃度的物質(zhì),甚至達到納摩爾(nM)級別。
2.高精確度:重復性好,測量誤差小。
3.寬泛的線(xiàn)性范圍:能夠覆蓋從很低到很高的濃度范圍。
4.快速讀數:現代光度計通常具備快速的數據處理能力,可以迅速給出結果。
5.多功能性:一些光度計可以進(jìn)行光譜掃描,獲取溶液的全波段吸收光譜。
應用:
1.DNA/RNA定量:測量溶液中的核酸濃度,是分子生物學(xué)實(shí)驗的常規操作。
2.蛋白質(zhì)分析:用于測定蛋白質(zhì)溶液的濃度及其在特定波長(cháng)下的吸收特性。
3.酶活性測定:監測酶促反應過(guò)程中底物或產(chǎn)物的變化。
4.藥物開(kāi)發(fā):在藥物篩選和藥效評估中測定化合物的濃度。
5.環(huán)境監測:測定水樣中的重金屬或其他污染物的含量。
6.化學(xué)合成:跟蹤化學(xué)反應過(guò)程中反應物或產(chǎn)物的濃度變化。
超微量光度計的操作注意事項:
1.樣品準備:確保樣品純凈無(wú)雜質(zhì),避免渾濁或沉淀影響測量結果。
2.校準:定期使用已知濃度的標準溶液校準光度計,保證數據準確性。
3.清潔維護:保持樣品室和光學(xué)元件的清潔,防止污染和腐蝕。
4.波長(cháng)選擇:根據待測物質(zhì)的吸收峰選擇合適的檢測波長(cháng)。
5.溫度控制:對于某些敏感的反應體系,需要控制樣品的溫度。